Оптимизация режимов проведения трансвагинальной УЗИ-ассистированной пункции фолликулов у телок ярославской породы

Технология прижизненной УЗИ-ассистированной пункции фолликулов яичников (OPU) – основной источник получения яйцеклеток для коммерческого производства эмбрионов коров во всем мире. Главным критерием оценки эффективности технологии считают количество полученных эмбрионов, пригодных для трансплантации, за определенный период времени использования донора. Цель исследования – определение оптимального режима проведения OPU у телок-доноров ярославской породы в отношении количественных и качественных характеристик получаемых ооцит-кумулюсных комплексов и их компетенций к дальнейшему развитию в системе in vitro. Работу выполняли на половозрелых телках ярославской породы (n=6) в возрасте от 3 лет 9 мес. до 3 лет 11 мес. В зависимости от временных режимов проведения OPU были сформированы две группы: 2/w – проведение OPU дважды в неделю с попеременным интервалом 4 и 3 дня (36 сессий); 1/w – проведение OPU один раз в неделю с интервалом 7 дней (17 сессий OPU). Увеличение интенсивности сессий с одного до двух раз в неделю не приводило к достоверному снижению числа УЗИ-видимых фолликулов (9,6±0,9 против 9,3±0,5) и числа полученных ооцит-кумулюсных комплексов (3,9±0,4 против 3,5±0,5), а также не оказывало негативного влияния на качество ооцитов: соответственно 69,7 против 67,8 % ооцит-кумулюсных комплексов по морфологическим критериям были классифицированы как пригодные. Выявлены достоверные различия между группами 2/w и 1/w по способности ооцитов к созреванию (91,8±2,8 % против 77,4±7,5 %, p<0,05) и первому делению дробления (80,6±4,0 % против 58,1±8,9 %, p<0,05). Различий между группами по выходу бластоцист не выявлено (27,6±4,5 % против 25,8±7,9 %). Повышение интенсивности сессий с одного до двух раз в неделю позволяет за определенный период времени с учетом достигнутой результативности (0,67±0,28 против 0,75±0,20 бластоцист на сессию) получать от телок-доноров ярославской породы в 2,25 раза больше эмбрионов, пригодных для дальнейшего использования.

1. Зиновьева Н. А., Позябин С. В., Чинаров Р. Ю. Вспомогательные репродуктивные технологии: история становления и роль в развитии генетических технологий в скотоводстве (обзор) // Сельскохозяйственная биология. 2020. Т. 55. № 2. С. 225–242. doi: 10.15389/agrobiology.2020.2.225rus.

2. Никитин Г. С. Современные подходы при получении и криоконсервации эмбрионов крупного рогатого скота in vitro // Международный вестник ветеринарии. 2021. № 3. С. 192–205. doi: 10.17238/issn2072-2419.2021.3.192.

3. Чинаров Р. Ю., Луканина В. А. Производство эмбрионов крупного рогатого скота с использованием прижизненно получаемых ооцитов: мировые тренды и перспективы (обзор) // Достижения науки и техники АПК. 2023. Т. 37. № 9. C. 31–38. doi: 10.53859/02352451_2023_37_9_31.

4. Viana J. H. M. A new milestone has been reached: transfers of IVP embryos were over one million worldwide // Embryo Technology Newsletter. 2022. Vol. 40. No. 4. P. 22–40.

5. Transvaginal ultrasound guided follicular aspiration of bovine oocytes / M. C. Pieterse, P. L. A. M. Vos, T. A. M. Kruip, et al. // Theriogenology. 1991. Vol. 35. P. 19–24.

6. Improvement of bovine in vitro embryo production by ovarian follicular wave synchronization prior to ovum pick-up / F. L. B. Cavalieri, F. Morotti, M. M. Seneda, et al. // Theriogenology. 2018. Vol. 117. P. 57–60. doi: 10.1016/j.theriogenology.2017.11.026.

7. Efficacy of repeated ovum pick-up in Podolic cattle for preservation strategies: a pilot study / G. A. Presicce, G. Neglia, A. Salzano, et al. // Italian Journal of Animal Science. 2020. Vol. 19. No. 1. P. 31–40. doi: 10.1080/1828051X.2019.1684213.

8. Transvaginal ultrasound-guided oocyte retrieval in cattle: State-of-the-art and its impact on the in vitro fertilization embryo production outcome / L. B. Ferre, H. Alvarez-Gallardo, S. Romo, et al. // Reproduction in Domestic Animals. 2023. Vol. 58. No. 3. P. 363–378.

9. Development during single IVP of bovine oocytes from dissected follicles: interactive effects of estrous cycle stage, follicle size and atresia / L. J. Hagemann, S. E. Beaumont, M. Berg, et al. // Mol Reprod Dev. 1999. Vol. 53. P. 451–458.

10. Effect of different stages of the follicular wave on in vitro developmental competence of bovine oocytes / P. J. Hendriksen, W. N. Steenweg, J. C. Harkema, et al. // Theriogenology. 2004. Vol. 61. P. 909–920. 11. Relationship between the time of OPU and in vitro embryo production / G. D. Goncalves, N. C. da Silva, C. B. Costa, et al. // Anim Reprod. 2022. Vol. 19. No. 2 spe. Article e22077. URL: https://www.animal-reproduction.org/article/6303e286a953953787028c83/pdf/animreprod-19-2-6303e286a953953787028c83.pdf (дата обращения: 17.10.2023).

11. Transvaginal ultrasound guided Ovum Pick-up (OPU) in cattle / M. Qi, Y. Yao, H. Ma, et al. // J Biomim Biomater Tissue Eng. 2013. Vol. 18. Article 118. URL: https://www.omicsonline.org/open-access/mir-is-associated-with-er-expression-gastriccarcinoma-of-xenografted-model-1662-100X.1000118.pdf (дата обращения: 15.09.2023). doi: 10.4172/1662-100X.1000118.

12. Different intervals of ovum pick- up affect the competence of oocytes to support the preimplantation development of cloned bovine embryos / L. J. Ding, H. B. Tian, J. J. Wang, et al. // Molecular Reproduction and Development. 2008. Vol. 75. P. 1710–1715.

13. Effect of breed, parity and frequency of collection on quality and quantity of OPU derived oocytes / S. Ali, A. Lemma, T. Degefa, et al. // World news of natural sciences. 2021. Vol. 34. P. 88–97.

14. Чинаров Р. Ю., Луканина В. А., Сингина Г. Н. Влияние различной интенсивности сессий трансвагинальной пункции фолликулов яичников на прижизненное получение ооцитов у коров // Молочное и мясное скотоводство. 2023. № 3. С. 33–37.

15. Результативность получения ооцитов коров при использовании различных временных режимов трансвагинальной пункции фолликулов / Р. Ю. Чинаров, В. А. Луканина, Г. Н. Сингина и др. // Достижения науки и техники АПК. 2020. Т. 34. № 2. С. 57–60. doi: 10.24411/0235-2451-2020-10212.

16. Нормы потребностей молочного скота и свиней в питательных веществах: монография / Р. В. Некрасов, А. В. Головин, Е. А. Махаев и др. Москва, 2018. 290 с.

17. Влияние пролактина на качество ооцитов, полученных методом трансвагинальной пункции фолликулов телок / Г. Н. Сингина, Р. Ю. Чинаров, В. А. Луканина и др. // Сельскохозяйственная биология. 2021. № 6. С. 1148–1155. doi: 10.15389/agrobiology.2021.6.1148rus.

18. Reed M., Woodward B., Swain J. E. Single or group culture of mammalian embryos: the verdict of the literature // J Reprod Stem Cel Biol. 2011. No. 2. P. 77–87.